DC-CIK细胞免疫治疗骨肉瘤的研究进展

骨肉瘤是由肿瘤细胞直接形成骨或骨样组织为特征的骨骼原发恶性肿瘤，其较长见于儿童和青少年，好发于长骨的干骺端，其中股骨远端或胫骨近端多见，其次为肱骨近端，随着血液运行转移率高且早，发展迅速。以往骨肉瘤患者的临床预后差，即使选择截肢手术治疗，５年内生存率也仅为20% 左右。近年来，由于多种化疗药物的发现，患者生存率得到明显提高，同时使得骨肉瘤患者的保肢治疗已成为主要趋势，对于原发无转移的患者，约70% 患者可以获得长期生存。但化疗同时也使患者免疫力下降，造血系统抑制，肝脏功能损伤等不良反应，以及肿瘤耐药导致部分患者无法完成化疗或预后不良。

生物免疫治疗可通过激发和利用机体免疫反应来拮抗肿瘤细胞，调节与平衡机体免疫功能，分化和抑制肿瘤生长，并有选择性的杀伤肿瘤细胞，已成为辅助治疗肿瘤的重要措施。树突状细胞 (dendritic cells，DC)是人体内功能强大的主要的抗原递呈细胞(antigen    presenting cell，APC) ，能诱导出抗原特异性细胞毒淋巴细胞反应，并可通过直接或间接方式影响β细胞(胰腺的胰岛中能产生胰岛素的细胞)的增殖，活化体液免疫应答。细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced        killer        cells，CIK) 是一种新型、高效、具有广谱杀瘤活性的非主要组织相容性复合体(major  histocompatibility  complex，MHC)限制性免疫效应细胞，在肿瘤免疫治疗中显露出巨大的应用价值。将DC和CIK 细胞联合治疗恶性肿瘤，有助于解除肿瘤患者的Ｔ细胞免疫无能和协同抗肿瘤的作用。目前，关于血液肿瘤、肝炎的DC-CIK的基础研究及临床应用较多，但DC-CIK在骨肉瘤研究报告尚较少，本文重点介绍DC、CIK 及DC-CIK联合治疗骨肉瘤的一些基础研究现状及发展前景。

DC-CIK细胞的免疫学特性DC是人体淋巴器官和组织中罕见的造血干细胞，是目前所知抗原递呈功能最强的抗原递呈细胞，其前体细胞由骨髓进入外周血，再分布到全身各组织，能促进细胞毒性Ｔ淋巴细胞(cytotoxic T      lymphocytes，CTL) 和辅助性Ｔ淋巴细胞的生成，提高肿瘤宿主免疫效应细胞的毒活性，是机体免疫反应的启动者和参与者。CIK 细胞是人外周血或人脐带血单个核细胞在体外用多种细胞因子如白细胞介素(interleukin，IL)     IL-2 、γ - 干扰素(interferon，IFN)IFN-γ和CD3单克隆抗体等诱导培养后获得的一群异质细胞，该细胞同时表达CD3 和CD56两种膜蛋白分子，是具有自然杀伤(natural killer，NK )细胞样Ｔ淋巴细胞[13]。CIK 细胞具有增殖能力强、杀瘤活性高、杀瘤谱广及非主要组织相容性复合体限制性杀瘤等优点[14]。研究表明将CIK 细胞与DC细胞联合培养，能产生DC-CIK 细胞，两者所分泌的细胞因子及表面分子既具有Ｔ细胞表面标志如TCR αβ、TCRγδ、CD3 、CD4 、CD8 ，也具有NK细胞表面标志。DC的抗原提呈作用能使CIK 细胞分泌IFN-γ的时间延长，分泌量增加，对肿瘤细胞的细胞毒活性增强，显著提高抗肿瘤活性。

目前，关于自体DC-CIK细胞免疫方法治疗恶性肿瘤在临床方面显示良好的应用前景，DC-CIK治疗部分恶性肿瘤(包括骨肉瘤)的临床实验已有进行，并有部分已成功应用于临床的Ｉ期和II期实验。Motta等通过采集多发性骨髓瘤患者的外周血单核细胞，通过标记抗CD14微珠后按照良好操作规范培养，86.7% 的细胞分化为DC细胞，可分泌大量的肿瘤细胞杀伤因子如IL-4 、IFN-γ等，成功制备了CD14+单核细胞免疫吸附制备DC疫苗，并应用于临床Ｉ期和II期实验，以增强多发性骨髓瘤患者的免疫和抵抗能力。Hongeng等研究CIK 在儿童恶性肿瘤中的应用(包括2例急性淋巴细胞白血病，2例大细胞淋巴瘤，2例骨肉瘤)发现CD3+CD56+能有效抑制肿瘤细胞活性，裂解肿瘤细胞，为儿童在过继免疫治疗的临床治疗方案提供了基础。Hontscha等[44]研究867例癌症患者，对其中384例患者进行自体CIK 细胞治疗，发现免疫反应率为23.7% ( 91/384 )， CIK 细胞治疗的副作用小，且比其对照组的无病生存率高，能明显改善生存期生活质量。Li 等在中国临床试验的CIK 治疗恶性肿瘤回顾中提出，CIK 细胞和DC共培养后，CIK 及CIK-DC细胞均显著增加，培养期限可明显缩短。并对936 例恶性肿瘤患者的临床试验分析发现其免疫反应率为51.7% ( 291/563)，表明 CIK 细胞可提高部分患者的免疫力。CIK作为细胞免疫治疗恶性肿瘤方法的一种，需结合其他治疗途径进行，其与DC结合治疗恶性肿瘤具有毒性及副作用小，安全系数高等优点。